1985年10月，王二妮出生在陕西省榆林市榆阳区大河塔乡冯家湾村。父亲王喜林、母亲刘彩霞，都是地道朴实的农民。王二妮上面有一个姐姐，下面有一个弟弟妹妹，她在家排行老二。王二妮一家六口，与爷爷奶奶挤在一个土窑洞里。
从懂事起，王二妮就体会到了生活的艰辛。5岁时，她就帮家里放牛、打猪草、做饭。王二妮的爷爷奶奶和爸爸妈妈都喜欢唱“信天游”，在亲人的影响下，王二妮痴迷唱歌。小小年纪她就会唱《绣荷包》《骑青马》等30多首歌曲。当地谁家办喜事，就请她去唱歌。主家给她几个白馍、几颗糖果，甚至一两块钱，她全交给父母。父亲用粗糙的手接过来，说：“咱家二妮真懂事，小小年纪就会替父母分忧了。”看着父亲眼角过早爬上的皱纹，王二妮心里酸酸的。
12岁时，王二妮对父母说：“爸妈，我想考艺校学唱歌。”王喜林夫妇尝够了生活的艰辛，总想让儿女有个好前程，答应了。1997年9月，王二妮考上了榆林市百花艺术学校戏曲舞蹈专业，每年学费1000元。这相当于王喜林全家一年的收入。当时王二妮的姐姐正在读卫校，刚交了学费，家里连200元都拿不出。王喜林挨家挨户向邻居借钱，又将家里的余粮、毛驴卖了，艰难给王二妮凑齐了学费。
王二妮没有舞蹈功底，为免遭淘汰，她每天凌晨5点就起床练功，常常累得连筷子都拿不稳。别的同学训练结束后，喝牛奶、吃蛋白粉补充体力，王二妮只能吃咸菜就馒头。
因4个儿女都在上学，王喜林夫妇承受巨大的经济压力。夫妇俩几年不买一双鞋子，王喜林农忙时种地，农闲时去建筑工地打工。1998年下学期开学，父母无法给王二妮凑齐学费，她只得欠着。女儿开学半个月后，王喜林打工的工地解散了。他决定去内蒙古打工，给王二妮挣学费。好心的工友给他凑了50元做路费，还给了他一袋白馍路上吃。想到女儿没有生活费，连饭都吃不上，王喜林绕到学校，将50元和白馍全留给了女儿，自己走着去内蒙古打工。
从家乡到内蒙古有800里，王喜林走了一个多星期。饿了他就摘野果子吃，向好心人讨一个饼。晚上他就睡在路边的桥底下或涵洞里，像一个流浪的乞丐。到达工地后，他两个脚板磨得全是血泡。雪上加霜的是，打工两个月后，王喜林的左脚被砸伤了，被迫回家养伤。父母的负担太重了，王二妮决定退学。她没与父母打招呼，就将行李和学习用品带回了家。无论父母怎么逼她回学校，王二妮就是不听。王喜林和妻子夜夜流泪，怪自己没本事，耽误了女儿。
就在这时，艺校校长亲自给王二妮写了一封信，决定免除她的全部学费。校长这样写道：“贫穷不是你的错，幼年的苦难会成为你一生的财富。你是一个有天赋的孩子，一定要在这条路上坚持下去！”王二妮这才含泪回到学校。
2000年，王二妮从艺校毕业后，进入安塞县民间艺术团当演员。她将每一笔演出费都积攒下来，与父母一道还清了家里的债务，并供姐姐上大学。2001年，王二妮在北京参加第一届农民歌手大赛，获得了第一名。她笑容甜美，嗓音干净，引起了圈内外人士的关注。2007年，王二妮参加央视《星光大道》，获得年度总决赛亚军，名扬全国。
为提升自己的歌唱技巧，2010年，王二妮拜歌坛老前辈王昆为师，并进入中国歌剧舞院担任独唱演员。此后她推出了自己的音乐专辑《爱陕北》《我从西边来》，并多次参加央视春晚，还在新加坡、香港，北京的人民大会堂，举办多场个人独唱音乐会，引起轰动。不仅如此，王二妮还参演了《哭恋》《奔向延安》等影视剧，事业全面开花。
2014年9月29日，王二妮与丈夫李飞结婚了。两人青梅竹马，相恋15年，彼此是对方的初恋。王二妮成名后，李飞觉得自己与她有差距，一度提出分手。他这样对王二妮说：“你现在是明星了，完全可以找个成功人士。我没房没车，配不上你，也没能力给你幸福。如果你离开我，我不怪你。”
王二妮不同意：“我还是从前的我，对你的感情永远不变。”为追随妻子，李飞做了王二妮的经纪人，帮她打理演出业务。2019年，王二妮在北京诞下一个健康可爱男婴，夫妻俩沉浸在幸福中。
从农村走出来的王二妮，成名后质朴依旧。她生活俭朴，但对父母却舍得花钱。2014年，王二妮演出挣了一点钱，本想在北京按揭买套房子。但她的弟弟在榆林市上班，父母跟着儿子生活，房子逼仄拥挤，生活很不方便。于是王二妮便将买房的钱拿出来，给父母在榆林市买了一套130平米的三居，她在北京租房住。
2019年，王二妮又积攒了一点钱，准备在北京买房。可房价上涨了，她这点钱连三分之一的首付都不够。儿子降生后，她只得与丈夫带着儿子继续住出租屋。有人对她说：“当年你不给父母买房，自己在北京买套房子多好，也免得现在四处租房。”王二妮说：“我不后悔，只有父母晚年幸福安稳，我在北京才能安心工作和生活。当年父亲步行800里为我挣学费，这不是一般父亲能做到的。在我心目中，父亲是最伟大的。”
王喜林上了年纪后，总想帮女儿做点什么。王二妮一直热心公益慈善，回馈社会。于是王喜林自制了一台电瓶车，在老家的旅游景区，给游客免费当司机。他还将家里的一匹骆驼牵到景区，供游人免费照相。他以这种方式回馈女儿，回馈社会。王二妮为父亲点赞！
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